分光光度法（Spectrophotometry）是一種常用的定量分析方法，通過測量物質(zhì)在特定波長的光線下的吸光度來確定物質(zhì)的濃度。它利用物質(zhì)對特定波長光的吸收特性，通過光的傳遞和吸收來推斷物質(zhì)的濃度。

分光光度法的定量依據(jù)主要包括貝爾－朗伯定律（Lambert-Beer Law）和比色法。貝爾－朗伯定律是分析中最基本、最常用的定量依據(jù)，它描述了光線透過物質(zhì)時的光強度與物質(zhì)濃度之間的關系。比色法則是根據(jù)被測樣品與標準溶液在特定波長下的吸光度差異來計算物質(zhì)濃度的方法。

貝爾－朗伯定律是分光光度法的核心理論，它表明在一定條件下，物質(zhì)溶液對特定波長的光線的吸光度與溶液中物質(zhì)濃度成正比。貝爾－朗伯定律可以用以下公式表示：

A = εlc

其中，A代表吸光度，ε代表摩爾吸光系數(shù)（molar absorptivity），l代表光程長度（path length），c代表物質(zhì)濃度。這個公式表明吸光度與物質(zhì)濃度成正比，光程長度和摩爾吸光系數(shù)的乘積決定了吸光度的大小。

比色法是分光光度法的一種常用分析方法，也是利用貝爾－朗伯定律來進行濃度測定的方法之一。比色法通過測量樣品和標準溶液在特定波長下的吸光度差異來計算物質(zhì)濃度。首先，選擇一個合適的波長，使得被測物質(zhì)在該波長下有較高的吸光度。然后，分別測量標準溶液和待測樣品在該波長下的吸光度，計算它們之間的吸光度差值。根據(jù)貝爾－朗伯定律，吸光度差值與物質(zhì)濃度成正比，通過與已知濃度的標準溶液進行對比，可以計算出待測樣品的濃度。

分光光度法具有測量準確、操作簡便、靈敏度高等優(yōu)點，因此在許多領域得到廣泛應用。例如，分光光度法可以用于環(huán)境監(jiān)測中水質(zhì)分析、廢水處理等方面，通過測量水中某些特定物質(zhì)的吸光度來判斷水質(zhì)的好壞。此外，分光光度法還可以用于制藥工業(yè)中對藥物濃度的測定，通過測量藥物在特定波長下的吸光度來確定藥物的含量。

雖然分光光度法在許多領域得到了廣泛應用，但也存在一些限制。例如，在樣品中含有多種物質(zhì)時，各種物質(zhì)的吸光度會相互疊加，導致測量結果的誤差。此外，樣品本身的顏色也會對測量結果產(chǎn)生影響。為了解決這些問題，可以通過選擇合適的波長、進行樣品前處理等方法來提高測量的準確性。

分光光度法是一種常用的定量分析方法，其定量依據(jù)主要包括貝爾－朗伯定律和比色法。貝爾－朗伯定律描述了光的傳遞和吸收的關系，比色法則是根據(jù)吸光度差異來計算物質(zhì)濃度的方法。分光光度法具有測量準確、操作簡便等優(yōu)點，在環(huán)境監(jiān)測、制藥工業(yè)等領域得到了廣泛應用。然而，也需要注意樣品中其他物質(zhì)的干擾以及樣品顏色對測量結果的影響。通過合理選擇波長和進行樣品前處理等措施，可以提高測量的準確性。